色譜分析時(shí)經(jīng)常會(huì)有先出來的峰就窄，后出來的就寬的情況。色譜峰寬是由很多因素構(gòu)成的，每個(gè)因素影響程度不同，造成的結(jié)果也不同，誰的影響力大，就主要顯示誰的作用結(jié)果。那么色譜峰寬，到底由哪幾部分構(gòu)成？

    色譜峰寬由兩部分構(gòu)成： 一、對(duì)稱峰寬。二、拖尾峰寬。所謂對(duì)稱峰寬，就是指這種峰寬不會(huì)造成峰型不對(duì)稱，不會(huì)出現(xiàn)拖尾前伸。而拖尾峰寬，就是指這個(gè)峰寬構(gòu)成，會(huì)導(dǎo)致峰形狀變的不對(duì)稱。我們首先要研究的是對(duì)稱峰寬，這個(gè)導(dǎo)致了峰寬的主要構(gòu)成。

一、對(duì)稱峰寬。

對(duì)稱峰寬主要包括兩部分：1、塔板理論正常展寬。2、正常進(jìn)樣峰展寬。

1、塔板理論正常展寬

    根據(jù)塔板理論，進(jìn)樣時(shí)處于0號(hào)塔板的組分，離開色譜柱時(shí)已經(jīng)占據(jù)了很多塊塔板，導(dǎo)致峰寬加大，并形成正態(tài)分布的峰型。

2、正常的進(jìn)樣展寬

    根據(jù)塔板理論，樣品進(jìn)樣時(shí)都停留在0號(hào)塔板上，但這是不可能的。因?yàn)橐粋€(gè)塔板的體積是如此的小，以至于根本放不下襯管里面哪怕是經(jīng)過分流之后的樣品。比如你的襯管有0.5ml，分流比50倍，那么進(jìn)入色譜柱的體積大約有10立方毫米。但你的毛細(xì)管柱內(nèi)徑就算是0.53mm的，可是這是直徑啊，算下來，這些樣品都進(jìn)去，也要占據(jù)大約50mm長(zhǎng)的柱子。也就是說，0號(hào)塔板放不下，要放到。。。。算你的柱子是50m，那么就是柱效的千分之一了，毛細(xì)管柱，算你10萬塊板，那么也是100塊塔板了。

   那么說，進(jìn)樣寬度就是100塊塔板了？錯(cuò)。進(jìn)樣寬度沒有這么大，只有這個(gè)數(shù)值除以分配比k之后的塔板數(shù)。為什么要除以分配比？因?yàn)樯V柱固定相可以溶解很多樣品中待測(cè)組分，所以待測(cè)組分在這100塊板上濃度不同，只有前面1/k的塔板上濃度比較高。

1、為什么毛細(xì)管柱，所有色譜峰基本一般寬？

答：因?yàn)槊?xì)管柱內(nèi)徑小，樣品進(jìn)樣正常展寬很大，而且因?yàn)橹剩ɡ碚撍鍞?shù)）高，所以塔板理論展寬與柱效率的平方根成反比，這個(gè)很小，所以峰寬主要由進(jìn)樣展寬構(gòu)成，而組分的進(jìn)樣展寬在色譜柱內(nèi)前進(jìn)時(shí)保持不變，所以從柱尾流出來的時(shí)候，寬度主要由進(jìn)樣展寬決定，而所有組分的進(jìn)樣展寬基本一致，因此都是一樣寬。

 2、為什么填充柱色譜，先出峰很窄，后出峰很寬？

答：因?yàn)樘畛渲膬?nèi)徑大，樣品進(jìn)樣正常展寬很小，所以峰寬主要是踏板理論展寬構(gòu)成，而根據(jù)踏板理論，峰寬與保留時(shí)間成正比，所以后出的峰比較寬。

3、為什么會(huì)有溶劑聚焦現(xiàn)象？

答：因?yàn)槿軇┚劢故侵涑跏紲囟缺热軇┓悬c(diǎn)低，導(dǎo)致溶劑在柱頭冷凝成液體，相當(dāng)于增加了一層溶解度很大的固定液，導(dǎo)致分配比k增加很多倍，這樣進(jìn)樣寬度就減小很多倍，所以色譜峰就窄了。

4、為什么有的難分離組分用薄膜柱子或者固定液涂澤量少的柱子來分析分離度大，而更多的組分用厚膜或者固定液涂澤量大的分離度高？

答：分離度等于保留時(shí)間之差除以峰寬之和的一半。根據(jù)速率理論，薄膜的柱子傳質(zhì)阻力小，所以柱效率高，分離度高。但根據(jù)進(jìn)樣寬度，厚膜柱子分配比k大，所以進(jìn)樣展寬小，色譜峰寬小，因此分離度高。

     一般來說，高含量組分用厚膜柱子好，可以減少進(jìn)樣寬度，增加分離度；低含量組分用厚膜柱子好，因?yàn)楹衲ぶ釉试S更大的進(jìn)樣量，檢出限高。啊？那么薄膜柱子就沒存在的必要了？錯(cuò)。薄膜柱子柱流失小的多，而且對(duì)于含量不大不小的樣品，也有更好的分離度。

來源于儀器信息網(wǎng)